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如何制作蛋白电泳胶

来源:www.dianzhidian.com 时间:2024-07-11 12:53:15 作者:神工制作网 浏览: [手机版]

如何制作蛋白电泳胶(1)

介绍

  蛋白电泳一种常用的生物化学分析方法,用分离和检测蛋白质神.工.制.作.网。蛋白电泳胶蛋白电泳实验中必不可少的材料,它一种聚丙酰胺凝胶,能够在电场中形成孔道,使蛋白质根据其大小和电荷性质行分离。本文将介绍如何制作蛋白电泳胶。

材料

  - 丙酰胺(acrylamide)

  - 甲基丙酰胺(N,N’-methylenebisacrylamide)

  - 特级去离子水

  - 10×TBE缓冲液

  - 过硫酸铵(ammonium persulfate,APS)

- 二甲基砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)

  - 硝酸银(silver nitrate)

步骤

  1. 准备蛋白电泳胶的模具。将模具清洗干净,用95%醇消毒,后晾干。

  2. 准备蛋白电泳胶的混合液。在一个干净的烧杯中,加入特级去离子水,加入所需的丙酰胺和甲基丙酰胺,按照比例混合均匀www.dianzhidian.com神工制作网。一般来说,丙酰胺的浓度为10-15%,甲基丙酰胺的浓度为0.5-1.5%。

  3. 加入缓冲液。将10×TBE缓冲液加入混合液中,使最终的缓冲液浓度为1×TBE。

  4. 加入APS。将APS加入混合液中,浓度为0.1%。

5. 加入DMSO原文www.dianzhidian.com。将DMSO加入混合液中,浓度为0.05%。

  6. 快速混合。将混合液快速混合均匀,避免产生气泡。

7. 倒入模具。将混合液倒入模具中,倒入量应该略多需要的量,以免出现空洞。

  8. 加入硝酸银dianzhidian.com。在蛋白电泳胶的表面加入少量硝酸银,这有助形成平滑的表面。

9. 固化。将模具放置在温下,让蛋白电泳胶固化,这需要约30分钟。

10. 去除模具。将固化好的蛋白电泳胶从模具中取出。

意事项

- 在制作蛋白电泳胶时,应该穿戴手套和护目镜,以免接触到有毒的丙酰胺和甲基丙酰胺www.dianzhidian.com神工制作网

  - 制作蛋白电泳胶的过程中,应该快速混合,以免产生气泡影响效果。

  - 在蛋白电泳胶固化前,应该在表面加入少量硝酸银,以形成平滑的表面。

- 制作好的蛋白电泳胶应该保存在冰箱中,避免受潮和污染。

如何制作蛋白电泳胶(2)

总结

制作蛋白电泳胶蛋白电泳实验中必不可少的步骤,正确的制作方法能够保证实验的准确性和可靠性。在制作蛋白电泳胶时,应该意安全和卫生,遵正确的步骤,以获得最佳的效果。

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