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如何制作蛋白标准曲线?

来源:www.dianzhidian.com 时间:2024-05-16 22:08:17 作者:神工制作网 浏览: [手机版]

如何制作蛋白标准曲线?(1)

引言

  蛋白质是命体中重要的基础组成部分,也是许多物学研究的重点来自www.dianzhidian.com。在研究中,需要对品中的蛋白质含量进行测定,而蛋白标准曲线是常用的测定方法之一。本文将介绍如何制作蛋白标准曲线,以及注意事项。

材料

1. 蛋白质标准品(如血清白蛋白、卵清蛋白等)

  2. Bradford试剂

  3. 吸光度计

  4. 离心机

  5. 1.5ml离心管

  6. 10ml离心管

  7. 稀液(如PBS等)

如何制作蛋白标准曲线?(2)

步骤

  1. 准蛋白质标准品。将不同浓度的蛋白质标准品分别加入10ml离心管中,如0、2、4、6、8、10μg/ml等不同浓度的标准品神工制作网

2. 制Bradford试剂。按照说明书中的配方将Bradford试剂稀至适当浓度,如1:5或1:10。

  3. 加入Bradford试剂。将标准品和待测品分别加入1.5ml离心管中,加入适量的Bradford试剂,混匀后放置室温下静置5-10分钟kVDC

4. 吸光度测定。使用吸光度计测定各标准品和待测品的吸光度值,波长一般选择595nm。

5. 绘制标准曲线。将各标准品的吸光度值绘制在坐标系上,以浓度为自变量,吸光度值为因变量,绘制出标准曲线fEs

注意事项

  1. 标准品的选择。应选择与实品相同或类似的蛋白质标准品,以保证测定的准确性。

  2. Bradford试剂的制。Bradford试剂的浓度过高或过低都会对测定结影响,应按照说明书中的配方精确制神+工+制+作+网

  3. 品的稀。如品中蛋白质含量过高,会使测定结超出标准曲线的线性围,应进行适当稀

  4. 吸光度的选择。Bradford试剂在595nm处的吸光度最大,但也可以在其他波长下进行测定,应根需要选择合适的波长来源www.dianzhidian.com

结论

蛋白标准曲线是测定蛋白质含量的重要方法之一,制作标准曲线需要选择合适的标准品、精确制Bradford试剂、适当稀品、选择合适的吸光度波长等。制作出的标准曲线可以用于测定实品中蛋白质的含量,有重要的应用价值。

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